构建携带p73α基因的慢病毒表达载体及检测其在卵巢癌细胞中的表达
赵璇
张洁清
王桂玲
1.广西医科大学附属肿瘤医院,广西南宁,5300212.广西医科大学附属肿瘤医院,广西南宁,5300213.广西医科大学附属肿瘤医院,广西南宁,530021
摘要：目的:构建携带p73α基因的慢病毒系统表达载体,成功感染人卵巢癌细胞PEO1后检测其蛋白质的表达.方法:将采用PCR技术获得全长p73α基因亚克隆到pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP中,构建慢病毒表达质粒PCDH-p73α,验证成功后与包装质粒pPACKH1-GAG、pPACKH1-REV、Pvsv-G共转293T细胞,获得重组慢病毒Lenti p73α后感染靶细胞人卵巢癌细胞PEO1(p73α基因表达缺失)后,RT-PCR和Western Blotting验证PEO1细胞中Lenti p73α的表达.结果:经酶切鉴定及基因测序证实PCDH-p73α中携带正确的p73α基因序列,与GenBank中序列一致;转染包装细胞293T后产生慢病毒颗粒能有效感染靶细胞PEO1,转导效率约为60%,并且存在p73α基因mRNA和蛋白水平的高表达.结论:本实验成功构建了PCDH-p73α慢病毒表达载体,包装成功后能有效感染卵巢癌PEO1细胞.
关键词：p73α慢病毒载体卵巢癌
分类号：R392.12(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30860303)广西医疗卫生重点科研课题项目(200871)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1-3 )
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