gutD基因的克隆及植物表达载体的构建
王悦1
燕丽萍2
夏阳2
李阳春3
洪春1
1.甘肃农业大学生命科学技术学院,兰州,730070;山东省林业科学研究院2.山东省林业科学研究院3.甘肃农业大学生命科学技术学院,兰州,730070
摘要：通过RT-PCR的方法从大肠杆菌K12中扩增出了gutD基因的全长cDNA片段,将其克隆到pMD18 T-vector中,序列分析表明克隆的片段长度为780bp,包含了完整的gutD基因的编码序列,除编码区第61位密码子由CTG变为CGT和第72位密码子CTT变为CCT其它序列与所报道的修正序列一致.以BamH Ⅰ和HindⅢ限制性内切酶从克隆载体上切取gutD基因,将其连接在相应酶切的中间载体KS上,再以KpnⅠ和BamHⅠ酶切重组子获得具粘性末端的目的片段(gutD)与植物表达载体pCAMBIA2300连接,重组质粒通过双酶切和PCR鉴定正确后,采用直接转化法将pCAMBIA2300-gutD质粒导入根癌农杆菌LBA4404,并用PCR方法进行了鉴定.
关键词：6-磷酸山梨醇脱氢酶基因(gutD)克隆序列分析PCR及酶切检测
分类号：S722.3(造林学、林木育种及造林技术)
论文发表日期：2007-11-01
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 39-41 )