猪传染性胃肠炎病毒Sa基因的克隆与序列分析
温海燕
菏泽学院动物科学系,山东菏泽,274015
摘要：将猪传染性胃肠炎病毒接种ST细胞进行增殖,待细胞出现明显的病变后,将细胞反复冻融3次收获病毒.根据GenBank中已发表的猪传染性胃肠炎病毒S基因的序列,设计合成了l对扩增S基因包含A抗原位点724bp基因片段(Sa)的引物,引物两端分别有BamH I和HindⅢ的酶切位点.以感染细胞提取的病毒RNA为模板,经RT-PCR扩增得到目的片段,然后将其克隆到pMD18-T载体上,经蓝白斑筛选和酶切鉴定选择阳性克隆进行序列测定,构建成功的重组质粒命名为pMD18-T-Sa.用DNAstar软件将其与GenBank上的序列进行同源性比较,结果表明,核苷酸同源性为97%以上,氨基酸同源性为93%以上.根据猪传染性胃肠炎病毒Sa基因核苷酸序列绘制的系统进化树,结果表明,试验株与TH-98株亲缘性最近.
关键词：胃肠炎病毒Sa基因克隆序列分析
分类号：S852.65+9.4(动物医学（兽医学）)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1-3 )