基于卵黄抗体的副溶血弧菌间接ELISA快速检测方法的建立
闫茂仓1
胡伟丽2
张赛乐3
王雪鹏4
1.浙江省海洋水产养殖研究所 浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室 浙江 温州 325005; 宁波大学海洋学院浙江宁波2.温州医科大学生命科技学院，浙江温州; 宁波大学海洋学院浙江宁波3.浙江省海洋水产养殖研究所 浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室 浙江 温州 3250054.山东农业大学动物科技学院 山东 泰安
摘要：本文主要研究了以水产致病性哈氏弧菌为抗原，免疫SPF蛋鸡，制备特异性卵黄抗体，从抗体的提取、纯化等方面进行了进一步的优化研究；建立基于IgY的快速、准确、定量的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗原菌浓度的技术；建立基于IgY的间接ELISA测定抗原浓度的技术方法，确定抗原包被浓度、一抗IgY和酶标二抗最适稀释倍数，抗原包被条件的选择，底物的最佳反应时间等间接ELISA的实验条件。建立了基于IgY的间接ELISA测定哈氏弧菌的方法，试验的最佳反应条件为：抗原最适工作浓度浓度为1×108cfu/ml，包被4℃过夜；一抗IgY稀释度分别为1：28；购买的兔抗鸡IgY-HRP酶标抗体作1：20000稀释；选择底物的最佳反应时间为20min。
关键词：卵黄抗体副溶血弧菌ELISA快速检测
分类号：S852.4+3(动物医学（兽医学）)
资助基金：浙江省科技计划(2012C22072)浙江省科技计划(2012F20029)浙江省科技计划(2009F20009)中央财政支持地方高校发展专项学科建设项目(xkc11011)温州市重点科技创新团队项目(C2012004-02)国家产业技术体系温州综合试验站(CARS-47)国家贝类产业技术体系项目(CARS-48)国家科技重大专项(2012C12017-3)国家科技重大专项(2012C13005)温州市科技计划(2011N0006)山东省现代农业产业技术体系贝类创新团队项目(SDAIT-19)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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