基于新型小鹅瘟病毒VP3基因间接ELISA快速检测方法的建立
曲艺1
刁非非2
王斌1
赵晓燕1
熊华萱1
陶涛1
陆冠亚1
王水明1
1.南京出入境检验检疫局 江苏 南京 2100002.东营市正邦养殖有限公司 山东 东营
摘要：应用PCR方法扩增了新型鹅细小病毒(NGPV)的VP3基因,然后将其克隆到原核表达载体中,获得重组质粒pGEX-VP3.将pGEX-VP3转化到DH5α感受态细胞中,诱导表达后分别用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行分析和鉴定.然后以表达的VP3蛋白作为抗原,包被ELISA板.分别对包被抗原的浓度、抗原封闭条件、血清的孵育条件、酶标二抗的孵育条件等进行优化,最终成功建立间接ELISA.VP3蛋白的包被稀释度为1:800,4℃包被过夜,5％脱脂乳4℃封闭过夜,血清稀释度为1:120,酶标二抗稀释度为1:1000,孵育时间为30min.此方法有良好的重复性及特异性,为临床检测新型细小病毒感染以及疫苗评价提供了参考方法.
关键词：新型小鹅瘟病毒VP3蛋白ELSIA快速检测
分类号：S852.65+9(动物医学（兽医学）)
资助基金：江苏出入境检验检疫局科技项目(2017KJ39)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 4-6 )