鸡toll样受体7的克隆表达及多克隆抗体的制备
孟巍1
郑世民2
杨桂君2
张瑞莉2
1.山东省枣庄市市中区行政审批服务局,山东 枣庄 277100;东北农业大学动物医学院,黑龙江 哈尔滨2.东北农业大学动物医学院,黑龙江 哈尔滨
摘要:本试验旨在制备兔抗鸡toll样受体 7(chicken toll-like receptor 7,chTLR7)多克隆抗体,根据GenBank已发表的chTLR7 序列设计引物,采用RT-PCR方法扩增chTLR7 胞外区基因片段,并构建原核表达重组质粒,通过优化蛋白表达条件,用获得的融合蛋白免疫兔制备多克隆抗体,通过免疫印迹及间接免疫荧光试验鉴定制备的兔抗chTLR7 多克隆抗体的特异性.结果显示,该片段长度为1 122 bp,与预测的片段大小、碱基序列一致.构建的原核表达重组质粒pGEX-6P-1-chTLR7 经IPTG诱导后,表达出预期 63 kDa的重组蛋白,免疫兔可产生特异性抗体.制备的兔抗chTLR7 多克隆抗体具有良好的特异性,为后续实验研究chTLR7 传导通路、免疫机制等相关研究提供有利工具.
关键词:鸡toll样受体7胞外区原核表达多克隆抗体
分类号:S859.79+7(动物医学(兽医学))
资助基金:国家自然科学基金(30972162)
论文发表日期:2023-07-28
在线出版日期:2026-05-22(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 16-18 )
