鸡源SAMHD1蛋白多克隆抗体的制备与鉴定
王一新1
张真研1
曹凤阳1
李阳2
徐瑞雪1
谢之景1
崔言顺1
李建亮1
1.山东农业大学动物科技学院,山东 泰安 2710182.中国动物卫生与流行病学中心,山东 青岛
摘要:为制备鸡源宿主限制因子SAMHD1(chSAMHD1)的多克隆抗体,本试验根据chSAMHD1基因序列设计引物,扩增部分chSAMHD1 片段,构建pET-chSAMHD1 原核表达质粒,并将其转化至BL21(DE3)大肠杆菌,经IPTG诱导和镍柱亲和层析纯化获得重组chSAMHD1 蛋白.将重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备抗chSAMHD1 多克隆抗体,通过Western blot和IFA测定多克隆抗体的反应性.结果显示,chSAMHD1 重组蛋白的相对分子质量约为 75.0 kDa,与预期大小一致;重组蛋白以包涵体形式表达;所制备的chSAMHD1 多克隆抗体效价达到 1:512 000;IFA结果证实,本试验所制备多克隆抗体能够特异性识别DF-1 细胞中过表达的chSAMHD1 蛋白.以上结果表明,该研究成功制备了chSAMHD1 蛋白多克隆抗体,从而为鸡源SAMHD1 蛋白功能的深入研究奠定了基础.
关键词:鸡源SAMHD1多克隆抗体制备鉴定
分类号:S852.65(动物医学(兽医学))
资助基金:山东省自然科学基金面上项目(ZR2019MC045)
论文发表日期:2024-01-28
在线出版日期:2026-05-22(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 30-34 )
山东畜牧兽医

山东畜牧兽医

ISSN:1007-1733
年,卷(期):2024,45(1)
所属栏目:试验研究