二重环介导等温扩增法快速检测鸭肉中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌
张林吉1
贾燕1
任春芝1
昌莉丽1
孙朋1
张青青2
任士飞1
1.徐州生物工程职业技术学院,江苏 徐州 2210062.南通市通州区第三人民医院,江苏 南通 226300
摘要：为了建立二重环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测体系快速检测鸭肉中沙门氏菌和金黄色葡萄球菌,本研究利用沙门菌invA基因和金黄色葡萄球菌SAR0395基因设计引物,以建立单重LAMP体系为基础,对引物浓度进行优化,建立二重LAMP检测体系,测定对单一菌株的特异性和灵敏度,并对两种细菌扩增产物的溶解曲线和溶解峰进行分析.结果显示,建立的单重LAMP体系分别能对沙门氏菌和金黄色葡萄球菌进行高效扩增,当沙门氏菌和金黄色葡萄球菌引物浓度比达到 2.5:1 时,建立的二重LAMP检测方法扩增效率最佳,建立的单重和二重LAMP检测方法对两种细菌具有较好特异性;二重LAMP对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的检测灵敏度分别为9.1×101 CFU/mL和 7.8×101 CFU/mL,可根据扩增产物溶解曲线和溶解峰温度的不同,实现对两菌有效鉴别.与传统方法比较,二重LAMP对鸭肉类产品检测符合率为 100%.结果表明,建立的二重LAMP检测方法灵敏度高、特异性强、可定性鉴定、检测周期短,可用于鸭肉中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的快速检测.
关键词：环介导等温扩增金黄色葡萄球菌沙门氏菌溶解曲线快速检测
分类号：S852.4(动物医学（兽医学）)
资助基金：徐州市科技计划项目(KC21297)
论文发表日期：2025-01-27
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1-5 )