基因工程菌发酵表达 rhG - CSF 的条件优化
王娟
李希平
1.鲁南制药集团股份有限公司,山东 临沂,2734002.鲁南制药集团股份有限公司,山东 临沂,273400
摘要：目的：通过优化基因工程菌 Escherichia coli BL21（DE3）Plys 表达重组人粒细胞集落刺激因子（ rhG -CSF）蛋白的发酵工艺，提高蛋白产量。方法以100 L 规模发酵为例，从不同的接种量（1%~10%）、加入 IPTG 进行诱导时的不同 OD600nm值，诱导表达后的不同溶氧可控制范围（20%~80%）等方面进行优化。用 SDS - PAGE 对蛋白表达量进行检测。结果优化后的方案为：采用5%的接种量，在 OD600nm达到10~15时加入诱导剂 IPTG，诱导起始后前20 min 控制溶氧在80%以下，20 min 后通过补加氨水控制 pH 在7.0左右，补料调节控制溶氧在20%~40%的范围内，诱导表达5 h 后收集菌体。优化后的发酵方案极大提高了蛋白表达量。结论 rhG - CSF 蛋白发酵方案的优化对大规模生产具有重要的指导意义。
关键词：重组人粒细胞集落刺激因子发酵溶氧基因工程菌
分类号：Q812(生物工程学(生物技术))
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 428-430 )
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