柴胡属药用植物多重实时荧光PCR检测方法的建立
张全芳1
范阳阳1
刘艳艳1
陈雪燕1
谭晴晴1
胡悦1
刘国霞1
汪冰2
林永强2
步迅1
1.山东省农业科学院生物技术研究中心,山东省农业科学院应用生命科学实验室,山东 济南2501002.山东省食品药品检验研究院,国家药品监督管理局胶类产品质量评价重点实验室,山东 济南250101
摘要：目的 用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)方法测定正品柴胡,为柴胡的分子鉴定提供依据.方法 从柴胡根茎中提取总DNA,根据ITS2序列,设计合成针对南柴胡和北柴胡的特异性引物和探针以及柴胡的通用引物与探针,通过对荧光聚合酶链式反应反应体系和反应条件的优化筛选,建立了多重实时荧光聚合酶链式反应方法,在同一聚合酶链式反应反应体系中可以同时鉴别南、北柴胡.结果 结果表明本试验设计的引物和探针具有很好的物种特异性,且灵敏度高,DNA检出限为0.08 ng.对46份样品检测,其中17份检出北柴胡源性成分,5份为南柴胡,其他样品均检测为伪品柴胡,检测结果与DNA测序结果一致.结论 该方法可以有效地鉴别出南、北柴胡源性成分,及伪品柴胡,对于保证柴胡药材的质量及用药安全具有重要意义.
关键词：ITS2基因多重实时荧光聚合酶链式反应南柴胡北柴胡
分类号：R282.5(中药学)
资助基金：山东省重点研发计划(No.2018GSF119002)山东省重点研发计划(GG201809150023)山东省创新公共服务平台计划(No.2018JGX111)创新工程项目(No.CXGC2018D03)
论文发表日期：2019-12-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 693-696,708 )
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