LAG3剪接变异体对肝癌细胞增殖及索拉非尼耐药的影响
陈帅1
梁燕文1
林建梭2
苏均宇3
任建卫4
刘义1
1.广东医科大学海洋与热带医学学院,广东湛江 5240232.广东医科大学基础医学院,广东东莞 5238083.广东医科大学药学院,广东东莞 5238084.深圳瑞科生物科技有限公司,广东 深圳 518100
摘要：目的 构建在肝癌细胞表达的免疫活化基因3(LAG3)剪接变异体稳转细胞株,探讨剪接变异体对肝癌细胞增殖及对索拉非尼耐药性的影响.方法 以Hep3B cDNA为模板,采用巢式PCR扩增LAG3基因,对琼脂糖凝胶电泳分离差异条带测序并与NCBI数据库中的LAG3转录变体对比,发现其相对人全长LAG3 mRNA缺少3号外显子(LAG3Δ3).构建LAG3Δ3-pIGvetor重组质粒,通过慢病毒系统将重组质粒转染至Hep3B细胞,嘌呤霉素筛选后,利用RT-qPCR和Western blotting验证稳转细胞是否构建成功,MTT法评估细胞增殖及耐药性.结果 筛选后的Hep3B-LAG3Δ3细胞LAG3Δ3 mRNA及蛋白水平较对照Hep3B-NC细胞增高(P＜0.000 1).过表达LAG3Δ3细胞的增殖能力更强,其对索拉非尼的耐药性相比Hep3B-NC细胞有所增强(P＜0.05).结论 成功构建Hep3B-LAG3Δ3剪接变异体稳转细胞株,LAG3Δ3可促进肝癌细胞增殖,减弱肝癌细胞对索拉非尼的敏感性.
关键词：淋巴细胞活化因子3剪接变异体稳转细胞耐药索拉非尼
分类号：R735.7(消化系肿瘤)
论文发表日期：2026-01-30
在线出版日期：2026-03-24（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 17-21,95 )
英文信息