甜瓜蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因正反义表达载体的构建
田红梅
樊继德
于喜艳
1.山东农业大学园艺科学与工程学院,山东泰安,2710182.山东农业大学园艺科学与工程学院,山东泰安,2710183.山东农业大学园艺科学与工程学院,山东泰安,271018
摘要:为了改善甜瓜果实的品质及研究甜瓜蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因的生物学功能,本试验分别构建了甜瓜果实SPS基因的正义及反义表达载体.用PCR方法将克隆到pMD18-T载体上的甜瓜SPS基因用带有Kpn Ⅰ和Xba Ⅰ酶切位点的引物扩增,然后将该扩增片段克隆到pMD19-T Simple载体上,再用Kpn Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切,得到该基因编码区3.37 kb的cDNA片段,将其定向插入到植物表达载体pROK2的Kpn Ⅰ/Xba Ⅰ克隆位点,构建了甜瓜果实SPS基因的正义表达载体.将已克隆到pMD18-T载体上的甜瓜SPS基因用Kpn Ⅰ和Hinc Ⅱ双酶切,得到该基因编码区830 bp的cDNA片段,将其定向插入到植物表达载体pROK2的Kpn Ⅰ/Sma Ⅰ克隆位点,构建了甜瓜果实SPS基因的反义表达载体.
关键词:甜瓜SPS基因正义表达载体反义表达载体构建
分类号:S652(瓜果园艺)Q782(基因工程(遗传工程))
资助基金:国家自然科学基金(30471191)
论文发表日期:2007-01-01
在线出版日期:2026-05-22(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 5-7 )
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