转基因玉米PCR检测体系的优化研究
何春梅
张成华
刘强
董瑞
高新学
汪黎明
刘铁山
1.山东省农业科学院玉米研究所,山东济南,2501002.山东省农业科学院玉米研究所,山东济南,2501003.山东省农业科学院玉米研究所,山东济南,2501004.山东省农业科学院玉米研究所,山东济南,2501005.山东省农业科学院玉米研究所,山东济南,2501006.山东省农业科学院玉米研究所,山东济南,2501007.山东省农业科学院玉米研究所,山东济南,250100
摘要:以转基因玉米为研究材料,从模板DNA的提取质量、Mg2+浓度、退火温度、引物用量等方面对PCR检测体系进行优化,建立了检测转基因玉米中外源基因的有效PCR反应体系.在优化体系中,25 mmol/L Mg2+用量由1.5μl降低为1.2μl,12.5 mmol/L引物用量由1μl降低为0.5μl,退火温度提高2℃.TouchDown PCR反应条件:95℃ 5 min;95℃ 1 min,62.5℃ 1 min(以后每个循环递减1℃),72℃ 1 min,循环15次;95℃1 min,57.5℃1 min,72℃1 min,循环20次;72℃延伸7 min.
关键词:转基因玉米RCR扩增反应体系
分类号:Q503(一般性问题)
资助基金:国家科技支撑计划项目(2007BAD31B03)
论文发表日期:2011-01-01
在线出版日期:2026-05-22(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 14-16,19 )
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山东农业科学

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CSTPCD
ISSN:1001-4942
年,卷(期):2011,(6)
所属栏目:生物技术