猪圆环病毒2型衣壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
姚永红1
崔然1
赵钦2
王刚3
肖一红1
周恩民2
1.山东农业大学动物医学院,山东泰安,2710182.西北农林科技大学兽医免疫学研究所/西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,7121003.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/兽医生物技术国家重点实验室/动物疫病诊断中心,黑龙江哈尔滨,150001
摘要：为获得猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白单克隆抗体,将516 bp的ORF2基因片段克隆入pET -28a(+),转化人大肠杆菌,在IPTG的诱导下表达,用SDS - PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定.将纯化的重组蛋白免疫小鼠,制备单克隆抗体,叠加ELISA方法检测两株单克隆抗体识别的抗原表位关系.SDS - PAGE和Western blot结果表明重组蛋白ORF2得到高效表达；筛选获得两株稳定分泌抗ORF2单克隆抗体的杂交瘤细胞系3H3和3F2,其分泌的单体均为IgG1亚型；且均具有较高的特异性和敏感性；叠加ELISA显示,两株单克隆抗体识别不同的抗原表位.本研究制备的单抗有较好的生物学特性,为PCV2的研究及快速准确诊断方法的建立提供了平台.
关键词：猪圆环病毒2型ORF2蛋白单克隆抗体
分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)
资助基金：公益性行业科研专项(200903055)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 9-12,21 )
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