牛肠道病毒 RT -PCR 检测方法的建立及初步应用
侯佩莉
程洪兵
刘晓
王洪梅
何洪彬
1.山东省农业科学院奶牛研究中心,山东 济南,2501002.山东省农业科学院奶牛研究中心,山东 济南,2501003.山东省农业科学院奶牛研究中心,山东 济南,2501004.山东省农业科学院奶牛研究中心,山东 济南,2501005.山东省农业科学院奶牛研究中心,山东 济南,250100
摘要:参照GenBank中登录的牛肠道病毒( BEV )全基因组序列,针对其3 D基因设计合成了1对特异性引物,提取病毒RNA,逆转录为cDNA,进行PCR扩增,经条件优化,建立了BEV的RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性进行验证。结果显示,该方法从分离的牛肠道病毒中扩增出了732 bp的特异性目的片段;且对牛传染性鼻气管炎病毒( IBRV)、牛病毒性腹泻病毒( BVDV)、牛轮状病毒( BRV)、牛冠状病毒( BCoV)等相关病毒均无交叉反应;其检出敏感度达10-1 TCID50。应用该方法对山东地区84份临床疑似发病牛样品进行检测,21份为阳性,阳性检出率为25%。
关键词:牛肠道病毒3D基因RT-PCR检测
分类号:S852.65+3(动物医学(兽医学))
资助基金:国家奶牛产业技术体系项目(Cars-37)泰山学者海外特聘专家基金(tshw20100417)国家自然科学基金(31072160)济南市留学人员创业计划(20120203)
论文发表日期:2014-01-01
在线出版日期:2026-05-22(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 13-16 )
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山东农业科学

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CSTPCD
ISSN:1001-4942
年,卷(期):2014,(2)
所属栏目:生物技术? 信息技术