洋葱 Ms 位点多重 PCR 标记的开发与优化
王振宝1
霍雨猛2
刘冰江2
缪军2
杨妍妍2
高莉敏2
孔素萍2
程斐3
陈宁3
吴雄2
1.山东省农业科学院蔬菜花卉研究所/山东省设施蔬菜生物学重点实验室/国家蔬菜改良中心山东分中心，山东 济南 250100; 青岛农业大学园艺学院，山东 青岛 2661092.山东省农业科学院蔬菜花卉研究所/山东省设施蔬菜生物学重点实验室/国家蔬菜改良中心山东分中心,山东 济南,2501003.青岛农业大学园艺学院,山东 青岛,266109
摘要：以本课题组已获得的洋葱Ms位点侧翼序列为基础，设计、筛选引物获得了一个兼容的多重PCR分子标记，并对其反应体系和反应程序进行了优化。优化后的扩增体系：10×PCR buffer （Mg2＋free）2．5μL、25 mmol/L MgCl24μL、2．5 mmol/L dNTP 6μL、DNA模板1μL （约50 ng）、10μmol/L引物各1μL、5 U/μL rTaq聚合酶0．6μL、用灭菌双蒸水补齐至25μL；反应程序：94℃预变性5 min；94℃变性30 s，65．4℃退火45 s，72℃延伸1 min，35个循环；最后72℃延伸10 min。优化后的体系和程序可以检测到清晰的目的条带，通过一次PCR反应即可鉴定Ms位点的3种基因型（ MsMs、Msms、msms），操作简单，稳定性好。
关键词：洋葱雄性不育Ms位点多重PCR标记
分类号：S633.203.6(蔬菜园艺)
资助基金：国家自然科学基金(31201635)国家科技支撑计划(2012BAD02B04)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 7-11 )
英文信息