烟草 WRKY -R1基因的克隆及瞬时表达分析
胡曼
宋丹丹
杨金淼
刘卫群
1.河南农业大学生命科学学院,河南 郑州,4500022.河南农业大学生命科学学院,河南 郑州,4500023.河南农业大学生命科学学院,河南 郑州,4500024.河南农业大学生命科学学院,河南 郑州,450002
摘要:以烟草根尖组织cDNA为模板,RT-PCR结合电子克隆得到NtWRKY-R1基因的完整ORF,序列分析显示,NtWRKY-R1具有WRKY转录因子家族典型的WRKYGQK保守结构域及C2 H2的锌指结构,属于WRKY转录因子家族第Ⅱ类。采用生物信息学方法对NtWRKY-R1蛋白的理化性质、进化关系和磷酸化位点进行预测和分析,结果表明,NtWRKY-R1与茄科植物保守结构域的同源性及系统进化关系最近;磷酸化位点分析显示该蛋白可能通过磷酸化作用修饰,进而对其相应的代谢活动进行调节。通过构建真核表达载体、建立瞬时表达分析体系,结果显示,NtWRKY-R1基因的过表达导致JA信号途径标记基因PDF1.2及烟碱合成关键酶基因PMT1表达量降低,推测NtWRKY-R1基因影响JA信号途径,进而调控烟碱合成。
关键词:烟草NtWRKY-R1基因克隆生物信息学分析瞬时表达分析信号途径
分类号:S572.035.3(农作物)
资助基金:国家自然科学基金(30971704)
论文发表日期:2014-09-01
在线出版日期:2026-05-22(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 12-16,20 )
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