花生热激蛋白 AhHSP70与热激因子 AhHSF 基因的克隆及表达分析
李翠1
侯蕾2
任丽3
张烨2
郑奕雄1
王兴军1
1.仲恺农业工程学院，广东广州 510225; 山东省农业科学院生物技术研究中心，山东济南 2501002.山东省农业科学院生物技术研究中心,山东济南,2501003.开封市农林科学研究院,河南开封,475004
摘要：热激蛋白（ heat shock proteins， HSPs）和热激转录因子（ heat shock factors， HSFs）在植物热胁迫信号转导和耐热性的产生过程中发挥了重要作用。本研究从花生转录组文库中筛选到HSP70、HSF的cDNA片段，通过序列比对在花生全基因组序列中获得这两个基因的基因组序列，根据序列信息设计引物，以花生叶片cDNA为模板扩增全长ORF并进行生物信息学分析。结果显示，AhHSP70基因的ORF全长为1962 bp，编码653个氨基酸，分子质量为71．45 kD，理论等电点pI为4．93；AhHSF基因的ORF全长为1212 bp，编码403个氨基酸，分子质量为46．03 kD，理论等电点pI为4．85。 AhHSP70与AhHSF均不具有信号肽，为可溶性蛋白，二级结构中有大量无规则卷曲。利用这两个基因的氨基酸序列分别与来源于其他物种HSP70、HSF的氨基酸序列进行同源比对，并构建进化树进行亲缘关系分析，结果表明，AhHSP70与大豆GmHSP70亲缘关系较近，与番茄SlHSP70亲缘关系比较远；AhHSF与菜豆PaHSF亲缘关系较近，而与蒺藜苜蓿MtHSF的亲缘关系较远。利用实时荧光定量PCR对AhHSP70和AhHSF在热胁迫情况下的表达进行分析，结果表明这两个基因在42℃高温条件下表达量显著升高，AhHSP70在高温胁迫3 h后表达明显升高，热处理24 h和48 h后，表达量为对照的50倍和135倍；转录因子AhHSF在高温胁迫3 h后表达明显升高，高温处理6 h后达到最高，随后下降。本研究初步验证了花生热激蛋白和热激因子基因在花生响应高温胁迫中的作用。
关键词：花生热激蛋白热激因子基因克隆序列分析基因表达
分类号：S565.203.2(经济作物)
资助基金：国家自然科学基金(21376281)国家高技术研究发展计划（863计划）(2013AA102602)科技创新项目(201102033)山东省自主创新成果转化专项(2012ZHZXIA0418)
论文发表日期：2015-04-02
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1-7 )
英文信息