新城疫病毒SD强毒株全长cDNA克隆的构建及序列分析
袁小远
杨金兴
张玉霞
孟凯
王友令
艾武
1.山东省农业科学院家禽研究所,山东 济南,2500232.山东省农业科学院家禽研究所,山东 济南,2500233.山东省农业科学院家禽研究所,山东 济南,2500234.山东省农业科学院家禽研究所,山东 济南,2500235.山东省农业科学院家禽研究所,山东 济南,2500236.山东省农业科学院家禽研究所,山东 济南,250023
摘要:将新城疫病毒SD强毒株的全基因组cDNA序列进行分段扩增,并将各个片段通过In-Fusion技术连于克隆载体pBR322上,获得了SD毒株的全基因组cDNA克隆.通过分段PCR扩增鉴定及全长测序分析,结果表明,SD毒株的全基因组cDNA克隆构建成功,并且成功引入T7启动子序列,全长基因组序列与亲本毒氨基酸序列的一致性为99.9%.单个序列比对发现,全基因组cDNA克隆中有11处碱基突变,其中只有2处引起氨基酸序列发生改变;整个序列未出现基因的缺失、插入变化,因此全长氨基酸的位数未发生任何变化.SD毒株全长cDNA克隆的成功构建和序列分析为后续的反向遗传操作奠定了关键的技术基础.
关键词:新城疫病毒基因组全长cDNA重组质粒序列分析
分类号:S852.65+9.5(动物医学(兽医学))Q781(基因工程(遗传工程))
资助基金:山东省自然科学基金面上项目(ZR2015CM009)畜禽重大疫病防控与高效安全养殖综合技术研发项目(2016YFD0501600)科技基础性工作专项(2012FY111000)科技创新工程项目(CXGC2016A10)科学院青年基金(2014QNM15)科学院青年基金(2015YQN61)科学院青年基金(2016YQN56)
论文发表日期:2017-01-01
在线出版日期:2026-05-22(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 12-15 )
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山东农业科学

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CSTPCD
ISSN:1001-4942
年,卷(期):2017,49(7)
所属栏目:生物技术·遗传育种·种质资源