番木瓜环斑病毒西瓜株系衣壳蛋白的原核表达及抗血清制备
黄显德1
王玉2
田延平2
古勤生3
李向东1
1.山东农业大学植物保护学院,山东泰安271018;山东省农业微生物重点实验室,山东泰安2710182.山东农业大学植物保护学院,山东泰安,2710183.中国农业科学院郑州果树研究所,河南郑州,450000
摘要:以感染番木瓜环斑病毒西瓜株系(papaya ringspot virus-watermelon strain,PRSV-W)的西葫芦叶片为供试材料,通过RT-PCR克隆PRSV-W衣壳蛋白(coat protein,CP)基因,并将其连接到原核表达载体pEHISTEV上得到重组质粒pEHISTEV-PRSV-W-CP.将其转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导后可表达分子量约为37 kD的融合蛋白.将融合蛋白从凝胶中切下,乳化后免疫新西兰长耳兔,制备PRSV-W CP的抗血清.间接ELISA测定该血清效价为1∶8192.Western blot检测结果表明,该抗血清只与感染PRSV的西葫芦样品有特异性反应,而与健康西葫芦、感染西瓜花叶病毒的西葫芦及感染马铃薯Y病毒的普通烟样品均无反应.本研究为PRSV的快速检测以及CP蛋白功能的研究奠定了基础.
关键词:番木瓜环斑病毒西瓜株系衣壳蛋白原核表达抗血清制备检测
分类号:S436.5(病虫害及其防治)Q78(基因工程(遗传工程))
资助基金:国家重点研发计划(SQ2017ZY060102)
论文发表日期:2017-01-01
在线出版日期:2026-05-22(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 86-89 )
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