水稻类受体蛋白激酶FTPK1的原核表达及其活性检测
李颖秀1
李臻2
潘教文2
王庆国2
刘炜1
1.山东师范大学生命科学学院,山东 济南 250014;山东省农业科学院生物技术研究中心/山东省作物遗传改良与生理生态重点实验室,山东 济南 2501002.山东省农业科学院生物技术研究中心/山东省作物遗传改良与生理生态重点实验室,山东 济南,250100
摘要：类受体蛋白激酶(receptor-like kinase,RLKs)是植物信号分子的受体,它能够通过胞内激酶域对底物进行磷酸化或去磷酸化,从而对下游靶基因的转录及表达进行调控,参与胞内信号转导,在植物生长发育及环境应答过程中发挥作用.本研究以水稻"中花11"cDNA为模板,通过PCR技术获得类受体蛋白激酶基因FTPK1的全长序列,进一步构建原核表达载体pET-28a-FTPK1后,经1 mmol/L IPTG诱导12 h,获得88 kD的诱导表达蛋白条带,显示FTPK1可在大肠杆菌中诱导表达.表达产物经Ni柱纯化及透析后,获得纯化的融合蛋白.FTPK1激酶活力检测显示,其可磷酸化蛋白底物His和MBP,具有一定的磷酸化活性.本研究为进一步制备FTPK1特异性抗体,深入解析其理化特性及生物学功能奠定了基础.
关键词：水稻类受体蛋白激酶FTPK1原核表达蛋白纯化激酶活力检测
分类号：S511.0353(禾谷类作物)
资助基金：山东省自然科学基金面上项目(2016ZRC02178)山东省农科院青年英才计划(2015-2017)山东省农科院青年英才计划(2016-2018)安徽师范大学培育项目(2015CGPY10)国家重点研发计划(2016YFD0100903)
论文发表日期：2018-05-02
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 7-13 )
英文信息