利用人工ta-siRNA策略培育抗PVY烟草
吴斌
姜珊珊
张眉
徐德坤
辛志梅
王升吉
摘要：人工ta-siRNA基因沉默技术具有同时表达多个ta-siRNA和产生ta-siRNA位置固定等特点,在精确性和高效性等方面有明显优势.本研究以马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)外壳蛋白(coat protein,CP)为靶基因,选取不同位置的3个siRNA为靶序列,烟草TAS3a作为ta-siRNA表达的骨架,分别构建植物表达载体PVY-CP5′、PVY-CPM和PVY-CP3′,并利用叶盘法转化烟草NC89.瞬时表达检测结果显示,3个syn-tasiRNA植物表达载体均能在植物体内成功表达siRNA;抗病性鉴定发现,转PVY-CP5′、PVY-CPM和PVY-CP3′的转基因株系中抗病株系的比率分别为45.08％、27.21％、61.90％;Northern杂交分析显示,目的片段转录产物(总RNA)的积累量与植株的抗病性呈负相关,转基因植株中均有siRNA存在,表明植株的病毒抗性是由RNA介导的.
关键词：人工ta-siRNA马铃薯Y病毒(PVY)RNA介导的病毒抗性转基因烟草
分类号：S572.034(农作物)
论文发表日期：2018-12-01
页数：5( 86-90 )
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