p53基因3'UTR双荧光素酶报告质粒的构建及其 与miRNA-2127靶向关系的验证
张玉霞
袁小远
王友令
孟凯
1.山东省农业科学院家禽研究所,山东济南,2500232.山东省农业科学院家禽研究所,山东济南,2500233.山东省农业科学院家禽研究所,山东济南,2500234.山东省农业科学院家禽研究所,山东济南,250023
摘要：为了验证miRNA-2127与p53基因的靶向关系,利用生物信息学软件预测p53与miRNA-2127的结合位点,全基因合成法合成该结合位点的野生型与突变型模板,并将其克隆到pmiR-RB-REPORTTM双荧光素酶报告载体中,构建野生型与突变型重组双荧光素酶报告质粒.将293 T细胞分为4组,分别共转染野生型报告质粒+阴性对照(NC)、野生型报告质粒+miRNA-2127、突变型报告质粒+NC、突变型报告质粒+miRNA-2127.检测各组细胞中荧光素酶活性差异,结果显示:共转染了野生型报告质粒+miRNA-2127的293T细胞与共转染了野生型报告质粒+NC组相比,荧光素酶活性显著降低(P<0.05);且突变型报告质粒+miRNA-2127组的相对荧光素酶活性显著高于野生型报告质粒+miRNA-2127(P<0.05),说明miRNA-2127能够靶向调控p53基因,且结合位点位于3'UTR区369—375间.
关键词：p53miRNA-2127双荧光素酶报告系统
分类号：S813.10(普通畜牧学)
资助基金：山东省自然科学基金项目(ZR2017BC039)山东省农业科学院青年科研基金项目(2015YQN61)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 14-17 )
英文信息