小麦Pinb基因启动子区CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建
张淑娟1
张荣志1
宋国琦1
李玉莲1
高洁1
李玮1
高世庆2
李根英1
1.山东省农业科学院作物研究所/农业部黄淮北部小麦生物学与遗传育种重点实验室/小麦玉米国家工程实验室,山东 济南 2501002.北京杂交小麦工程技术研究中心,北京 100097
摘要：CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术已经逐渐成熟并在多种植物中得到成功应用,促进了基因功能的研究.小麦籽粒硬度是决定小麦加工品质的重要性状,Pinb是控制籽粒硬度的关键基因之一.本研究以小麦Pinb基因为对象,联合采用常规PCR和Golden Gate cloning技术,构建了包含小麦Pinb基因启动子区双靶点的CRISPR/Cas9基因编辑载体.将重组载体转入小麦原生质体中进行sgRNA活性的检测,在两个靶点位置均发生了突变,编辑效率分别为4.57％和4.37％,基因编辑类型包括碱基替换和碱基缺失.该研究为在小麦中实现Pinb基因的定点突变奠定了基础,对其功能研究和小麦品质改良均具有重要意义.
关键词：小麦CRISPR/Cas9基因编辑Pinb基因
分类号：S512.103.53(禾谷类作物)Q782(基因工程（遗传工程）)
资助基金：转基因生物新品种培育科技重大专项(2018ZX08009-10B)农业科技创新工程项目(CXGC2019G02)山东省农业良种工程项目(2019LZGC015)国家重点研发计划(2016YFD0100500)
论文发表日期：2020-01-28
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 1-9 )
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