烟草环斑病毒RT-PCR检测体系的优化
郇晓雪1
刘晓宇1
房乐1
杜传印2
李广强3
耿超1
李向东1
田延平1
1.山东农业大学植物保护学院,山东 泰安 2710182.山东潍坊烟草公司,山东 潍坊 2610613.枣庄市农业农村事业发展中心,山东 枣庄 277899
摘要：烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus,TRSV)是豇豆花叶病毒科(Comoviridae)线虫传多面体病毒属(Nepovirus)的代表种,是我国公布的二类进境检疫有害生物.建立特异性强、灵敏性高的检测体系是有效控制TRSV传播的技术保障.本研究在分析引物的特异性、优化退火温度及dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶浓度的基础上,建立了完善的TRSV RT-PCR检测体系.筛选出的TRSV特异性引物对为1-1 F/1-1 R,在退火温度为53℃、dNTPs终浓度为0.075 mmol/L、引物终浓度为0.30μmol/L、Taq DNA聚合酶终浓度为0.035 U/μL条件下检测效率最高,可从发病植物总RNA量为0.090 ng中检测到目的片段.研究结果对准确灵敏地检测TRSV具有重要意义.
关键词：烟草环斑病毒检测体系逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)优化
分类号：S435.72(病虫害及其防治)
资助基金：国家自然科学基金(31871933)国家自然科学基金(31501612)
论文发表日期：2021-06-28
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 98-102 )
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