新城疫强毒特异性反转录荧光定量PCR检测方法的建立与应用
徐敏丽1
于江1
逯璐2
张玉玉1
任素芳1
陈智1
孙文博1
郭立辉1
吴家强1
张琳1
1.山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东 济南 2501002.山东管理学院新兴业态发展研究所,山东 济南 250357
摘要:为建立一种敏感性高、特异性强、成本更低的新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)特异性反转录荧光定量PCR(reverse transcription fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测方法,基于对所有已知NDV F基因序列特征的分析,设计了一对强毒特异性引物,以体外转录制备的RNA标准品为阳性模板,构建了标准曲线,并对该方法的敏感性、特异性和准确性进行了验证.结果表明,基于SYBR GreenⅠ嵌合荧光技术建立的检测方法能够特异性扩增NDV强毒,最低可检测1拷贝/μL的RNA,用于临床毒株的检测结果与序列测定一致,可作为适合大规模监测NDV强毒的方法和工具.
关键词:新城疫病毒强毒反转录荧光定量PCR监测
分类号:S852.65+7:Q503(动物医学(兽医学))
资助基金:泰山学者特聘专家工程经费(ts201511069)农业科技创新工程项目(CXGC2021A12)
论文发表日期:2021-08-28
在线出版日期:2026-05-22(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 112-118 )
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山东农业科学

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CSTPCD
ISSN:1001-4942
年,卷(期):2021,53(8)
所属栏目:加工贮藏·分析检测