花生MITE反应体系优化及其遗传多样性分析
徐彪1
王佰众2
李玉发2
杨翔宇2
王伟2
牛海龙2
李伟堂2
刘红欣2
吴松权3
何中国2
1.延边大学农学院,吉林 延吉 133000;吉林省农业科学院花生研究所,吉林 公主岭 1361102.吉林省农业科学院花生研究所,吉林 公主岭 1361103.延边大学农学院,吉林 延吉 133000
摘要：为了建立适宜不同来源花生种质遗传差异分析的MITE反应体系,本研究从反应体系总量、Taq PCR Mix用量、引物浓度、模板DNA浓度及退火温度、循环次数方面对反应体系进行优化,得到的最佳反应体系为:反应总体积10μL,模板DNA 20 ng,引物(15μmol/L)2μL,Taq PCR Mix 5μL.反应程序为95℃预变性3 min;95℃变性30 s,58℃退火40 s,72℃延伸30 s,循环32次;72℃延伸10 min;4℃保存.利用优化的反应体系从50对AhMITE引物中筛选出11对多态性高的引物,并用于对22份不同来源的花生种质进行遗传多样性分析.结果表明,共扩增出23条带,其中,多态性带21条,多态性比例为91.3％,每个引物平均扩增的多态性带为1.91条.种质间遗传相似系数在0.222～0.957之间,平均值为0.644;通过NTSYS-pc Version 2.1软件基于UPGMA法进行聚类图绘制,在遗传相似系数为0.62时可将22份花生种质分为3大类.表明经过优化的AhMITE反应体系可以有效地用于不同来源花生种质的遗传多样性分析,表现出良好的多态性,可为进一步使用AhMITE标记对花生品种鉴定和遗传图谱构建奠定基础.
关键词：花生AhMITE标记反应体系优化遗传多样性分析
分类号：S565.203(经济作物)
资助基金：吉林省现代农业产业技术示范推广项目(202106)吉林省农业科技创新工程人才基金(C02103506)
论文发表日期：2022-01-28
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1-6 )
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