国槐SSR-PCR反应体系的建立与优化
张明静1
庞彩红2
李际红3
李双云2
付茵茵2
哈新英4
夏阳2
1.山东省林业科学研究院/山东省林木遗传改良重点实验室/黄河三角洲林木遗传育种国家林草局重点实验室,山东 济南 250014;山东师范大学生命科学学院,山东 济南 250014;山东农业大学林学院,山东 泰安 2710182.山东省林业科学研究院/山东省林木遗传改良重点实验室/黄河三角洲林木遗传育种国家林草局重点实验室,山东 济南 2500143.山东农业大学林学院,山东 泰安 2710184.济南市城乡建设发展中心,山东 济南 250000
摘要：利用单因素试验结合L16(45)正交试验设计对国槐SSR-PCR反应体系中的5个主要影响因素(Mg2+、引物、dNTPs、ExTaq酶、模板DNA用量)进行优化,确定最佳反应体系为(10μL):25 mmol/L Mg2+1.0μL,2.5 mmol/L dNTPs 0.2μL,10μmol/L上下游引物共0.5μL,5 U/μL ExTaq酶0.05μL,30 ng/μL模板DNA 1.0μL,10×PCR Buffer 1.0μL,ddH2O 6.25μL.随机挑选4对SSR引物和8个国槐种质对试验确定的最佳反应体系进行验证,均能获得清晰、稳定的条带.该优化反应体系的建立为利用SSR标记对国槐种质资源进行深入研究和利用奠定了基础.
关键词：国槐SSRPCR反应体系优化
分类号：S792.26:Q503(森林树种)
资助基金：山东省重点研发计划项目(2019GNC106116)山东省林业科技创新项目(2019LY001)
论文发表日期：2022-05-28
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 10-15 )
英文信息