牛病毒性腹泻病毒E6rn0s～145aa片段可溶表达及抗体间接ELISA检测方法的建立
张宇名1
李树凡1
陈志远1
迟丽丽1
刘健1
于泽海1
张玫瑜1
康京丽2
徐守振1
1.青岛农业大学动物医学院,山东 青岛 2661092.中国动物卫生与流行病学中心,山东 青岛 266032
摘要：为建立牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)抗体间接ELISA检测方法,本研究对山东地区规模化奶牛场BVDV主要流行亚型的Erns蛋白进行表位分析,原核可溶表达优势抗原表位片段E6rn0s～145aa,经Western blot及LC-MS/MS鉴定后作为ELISA包被抗原,对影响ELISA试验的各个因素进行优化,并进行特异性、敏感性、重复性试验等.结果显示,间接ELISA方法优化后的条件为:0.25μg/mL抗原包被37℃2 h后4℃过夜,10％马血清封闭时间1.5 h,1:5稀释一抗孵育1.5 h,1:8000稀释二抗孵育60 min,显色25 min.该方法特异性、灵敏性及重复性良好,与商品化BVDV抗体检测试剂盒总体符合率为88.04％,符合率良好.本研究建立了一种特异性、灵敏性及重复性良好的BVDV抗体间接ELISA检测方法,为山东地区BVDV防控及临床检测提供了一种有效工具.
关键词：牛病毒性腹泻病毒Erns蛋白抗体间接ELISA
分类号：S852.65+3(动物医学（兽医学）)
资助基金：国家重点研发计划(2018YFD0501403)
论文发表日期：2022-11-28
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：11( 127-137 )
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