3种常见金银花致病菌多重实时荧光定量PCR检测方法研究
朱桐杉1
刘艳艳2
谭晴晴2
刘国霞2
陈雪燕2
步迅2
王文博3
于子涵4
张全芳2
张永清1
1.山东中医药大学药学院,山东 济南 2503552.山东省农业科学院农作物种质资源研究所,山东 济南 2501003.山东省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所,山东济南 2501004.山东中医药大学药学院,山东 济南 250355;山东中医药大学附属医院,山东济南 250013
摘要：为了建立可同时检测炭疽病病原菌(Colletotrichum gloeosporioides)、白粉病病原菌(Erysiphe lonicera)和褐斑病病原菌(Cercospora rhamni)3 种金银花重要叶部病原菌的多重实时荧光定量PCR快速检测方法,本试验基于 3 种病原菌ITS片段序列分别设计特异引物和Taq Man荧光探针,并制备重组质粒建立标准曲线;对建立的多重实时荧光定量PCR检测方法进行特异性、灵敏度、准确性验证.结果表明,本研究建立的多重实时荧光定量PCR快速检测方法仅针对金银花炭疽病、白粉病和褐斑病病原菌有特异性扩增;最低检测限为2.94×102 copies/μL,比普通PCR法高 100 倍;利用本方法检测 15 份有叶部病害症状的金银花病叶,与DNA测序结果完全一致.综之,本研究建立的多重实时荧光PCR检测方法特异性强、灵敏度高,为金银花炭疽病、白粉病和褐斑病的早期诊断提供了技术支持.
关键词：金银花炭疽病白粉病褐斑病多重实时荧光定量PCR
分类号：S435.121.4(病虫害及其防治)
资助基金：山东省高校中药质量控制与全产业链建设协同创新中心项目(CYLXTCX2021-06)山东省创新公共服务平台计划中药分子鉴定公共服务平台项目(2018JGX111)
论文发表日期：2023-07-28
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 145-151 )
英文信息