非洲猪瘟病毒p22蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
矫健1
李建达2
韩先杰3
张琳2
张玉玉2
任素芳2
刘飞2
陈智2
Nataliia Hrabchenko2
张文娟4
于江1
吴家强1
1.青岛农业大学动物医学院,山东 青岛 266109;山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室/农业农村部畜禽生物组学重点实验室,山东 济南 2501002.山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室/农业农村部畜禽生物组学重点实验室,山东 济南 2501003.青岛农业大学动物医学院,山东 青岛 2661094.山东碧蓝生物科技有限公司,山东 泰安 271400
摘要：非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的一种高度传染性病毒性疾病,发病率和死亡率高达 100%,对我国的生猪养殖业造成了毁灭性打击.p22 蛋白为ASFV的结构蛋白,本研究构建了重组原核表达质粒pET-32a-p22,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞表达重组p22 蛋白并纯化,经Western blot鉴定证实重组p22 蛋白与ASFV阳性血清有良好的免疫反应性.利用重组p22 蛋白免疫Balb/c小鼠并通过间接ELISA方法筛选到 2 株能够稳定分泌p22 蛋白单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株 2D6 和 5E7.经抗体亚型鉴定两株抗体均为IgG1 型;经Western blot鉴定,两株抗体能够特异性识别过表达的p22 蛋白.综上,本研究成功表达并纯化了p22 重组蛋白,制备了p22 单克隆抗体,为进一步探讨p22 蛋白的结构功能及其在ASFV中的感染致病机制提供了基础条件.
关键词：非洲猪瘟病毒p22蛋白单克隆抗体原核表达
分类号：S852.65+1(动物医学（兽医学）)
资助基金：山东省重点研发计划项目(2020CXGC010801)山东省重点研发计划项目(2022TZXD0041)山东省重点研发计划项目(2022CXPT010)山东省重点研发计划项目(2021LZGC001)山东省现代农业产业技术体系(SDAIT-08-01)山东省农业科学院农业科技创新工程项目(CXGC2023F10)山东省农业科学院农业科技创新工程项目(CXGC2023A21)山东省农业科学院农业科技创新工程项目(CXGC2023A21)
论文发表日期：2023-10-28
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 140-145 )
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