利用种子红色荧光标记鉴定转基因番茄后代
章力1
魏凯1
李珊珊2
宁宇2
路菲菲2
王孝宣2
国艳梅2
刘磊2
李鑫2
杜永臣2
李君明2
黄泽军2
1.中国农业科学院蔬菜花卉研究所/蔬菜生物育种全国重点实验室,北京 100081;中国农业大学园艺学院,北京 1000812.中国农业科学院蔬菜花卉研究所/蔬菜生物育种全国重点实验室,北京 100081
摘要：转基因技术有助于番茄基因功能研究和遗传改良,其中转基因后代的筛选是一个非常重要但工作量大的环节.本研究基于番茄油体蛋白基因家族序列分析和番茄基因表达数据库SGN-TEA搜索结果,克隆了一个种子特异且高水平表达的油体蛋白基因SlOLE1(Solyc06g034040).利用无缝克隆的方法将红色荧光蛋白基因TagRFP的编码区序列插入到SlOLE1 基因的终止密码子前,形成一个嵌合基因SlOLE1-TagRFP.将嵌合基因插入到pBI121 双元载体,构建植物表达载体pSlOLE1-TagRFP,利用农杆菌介导法转化番茄品种'Money Maker',T0代植株的自交种子在荧光显微镜下呈现出明亮红色荧光或无荧光.PCR分子标记进一步验证发现,红色荧光种子萌发的幼苗均存在TagRFP序列,表明在种子阶段检测红色荧光筛选转基因番茄后代的准确率为 100%.由此,本研究建立了一种利用SlOLE1-TagRFP嵌合基因,可以通过种子红色荧光可视化分析,简单快速、低成本地鉴定转基因番茄后代的方法.
关键词：番茄种子红色荧光蛋白油体蛋白转基因鉴定
分类号：S641.2(园艺)Q781(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家重点研发计划(2022YFD1200500)国家大宗蔬菜产业技术体系项目(CARS-23-A06)国家自然科学基金(31872949)
论文发表日期：2024-04-28
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 1-8 )
英文信息