鸡传染性喉气管炎病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用
张玉霞
董雯雯
袁小远
孟凯
徐怀英
山东省农业科学院家禽研究所,山东 济南 250100
摘要：鸡传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)以往多感染蛋鸡,近年来在蛋种鸡、商品肉鸡中连续多发,表明该病毒感染谱有扩大风险,因此有必要加强对ILTV的监测.为建立高效、灵敏的ILTV检测方法,本研究以ILTV的TK基因为靶基因设计引物,扩增并构建pMD18-T-TK质粒标准品,建立SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法和标准曲线,对其特异性、敏感性和重复性进行验证,并对临床疑似病例进行检测.结果发现,该检测方法特异性良好,与其他常见症状相似病原无交叉反应;最低检测浓度为1.55 拷贝/μL,灵敏度是普通PCR方法的 10 倍;重复性好,批内、批间变异系数在 0.79%～1.83%之间.表明本研究建立的ILTV实时荧光定量PCR方法特异性强、灵敏度高,可为ILTV的临床诊断和流行病学研究等提供有效的检测方法.
关键词：鸡喉气管炎病毒TK基因实时荧光定量PCR特异性敏感性重复性
分类号：S858.31(动物医学（兽医学）)
资助基金：山东省农业科学院农业科技创新工程项目(CXGC2023A10)山东省农业科学院农业科技创新工程项目(CXGC2023A22)山东省重点研发计划项目(2022LZGC014)山东省自然科学基金(ZR2021MC060)
论文发表日期：2024-06-28
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 128-132 )
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