辣椒CaWRKY39基因克隆及其酵母单杂交pGADT7载体构建
夏玉琪1
郑贤涛2
武士波3
刘雅婷4
1.云南农业大学农学与生物技术学院,云南 昆明 6502012.云南农业大学植物保护学院,云南 昆明 6502013.云南农业大学烟草学院,云南 昆明 6502014.云南农业大学农学与生物技术学院,云南 昆明 650201;云南农业大学烟草学院,云南 昆明 650201
摘要：辣椒是我国重要的经济作物之一,但番茄斑萎病毒(TSWV)极易造成其巨大的生产损失,亟需有效的防治策略.前期研究发现,辣椒转录因子CaWRKY39 在TSWV侵染下特异性高表达,推测其可能在辣椒抗TSWV中发挥重要作用.本研究从辣椒'萧新 19'叶片中克隆了CaWRKY39 基因,并对其进行生物信息学分析,结果表明,CaWRKY39 的CDS全长为 1 035 bp,编码一个由 344 个氨基酸组成、相对分子量为 38 570.53 Da、理论等电点为 9.59 的稳定疏水蛋白,该蛋白二级结构和三级结构主要由无规则卷曲构成,占比为60.76%.系统进化分析发现CaWRKY39 蛋白与棉花GhWRKY39 蛋白亲缘关系最近,表明两者功能可能具有相似性.为进一步验证CaWRKY39 对相关抗性基因的靶向调控作用,采用RT-PCR技术扩增CaWRKY39 基因CDS序列,利用NdeⅠ、Eco RⅠ双酶切,并通过无缝克隆的方法成功构建了酵母单杂交表达载体pGADT7-CaWRKY39.本研究结果可为深入研究CaWRKY39 转录因子参与辣椒抗TSWV病毒的分子机理提供技术支持和参考.
关键词：辣椒CaWRKY39生物信息学分析酵母单杂交pGADT7载体构建
分类号：S641.3(园艺)Q781(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家自然科学基金(32260681)
论文发表日期：2024-07-28
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 39-45 )
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