基于高分辨率熔解曲线分析技术鉴别丹参及其混伪品
赵景莹1
张玉娟2
柳展基2
赵方洲2
汤慧丽1
王宪昌2
朱彦威2
田北京2
韩金龙2
邬爽2
高春华2
单成钢2
1.山东中医药大学药学院,山东济南 250355;山东省农业科学院经济作物研究所,山东济南 2501002.山东省农业科学院经济作物研究所,山东济南 250100
摘要：本研究旨在建立一种基于高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)技术高效鉴别丹参及其混伪品的方法.研究采用硅胶吸附柱法纯化基因组DNA,并针对鼠尾草rDNA ITS2区序列设计特异性引物,通过依次对引物浓度、DNA模板浓度、退火温度和循环次数进行系统优化,建立了ITS2熔解曲线模型,并采用HRM技术对不同来源丹参及其混伪品(甘西鼠尾草、云南丹参和鼠尾草)进行鉴别.结果表明,在最适引物浓度为2.5～10.0 μmol/L,DNA模板浓度为26.95～53.90 ng/μL,退火温度为58℃,循环数为35～45时可获得稳定、均一、特异的PCR扩增曲线.该方法通过对比熔解温度(Tm)即可实现对丹参与甘西鼠尾草、云南丹参及鼠尾草的真伪鉴别,在丹参及其伪品的快速检测方面具有独特的优势.
关键词：高分辨率熔解曲线分子鉴定丹参伪品
分类号：S567.5+3(经济作物)
资助基金：山东省农业良种工程项目(2021LZGC008)山东省现代农业产业技术体系中草药产业体系首席专家项目(SDAIT-20)济宁市重点研发计划项目(2021ZYNS002)山东省农业科学院农业科技创新工程项目(GXGC2023D04)
论文发表日期：2024-09-28
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 116-123 )
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