积雪草CaCYP716E41基因的克隆及表达分析
门宇辰1
常婉琦1
蔡起航1
李羽纶1
孙正海1
李丽萍2
1.西南林业大学园林园艺学院/云南省观赏草集成利用国际联合研发中心/云南省高效经济林培育示范型国际科技合作基地/云南省面向南亚东南亚经济林全产业链联合研发中心,云南 昆明 6502242.西南林业大学湿地学院,云南 昆明 650224
摘要：齐墩果酸 6-β-氧化酶(oleanolic acid 6-beta-oxidase,CYP716E41)是三萜类化合物的骨架修饰酶,调控三萜类化合物组成不同的结构.齐墩果酸(oleanolic acid)是重要的三萜类化合物,具有多种生物活性.本研究通过 RT-PCR 技术从积雪草叶片组织中克隆得到 CaCYP716E41 基因,并对其进行生物信息学分析.结果显示,CaCYP716E41 基因 CDS 区全长1 434 bp,编码 477 个氨基酸,蛋白分子质量为 53.88 kDa,理论等电点为 8.74,为亲水性稳定蛋白.蛋白质结构分析发现,该蛋白具有多个血红素结合位点,属于细胞色素 P450超家族,含有 1 个跨膜结构且有 44 个磷酸化位点.基于蛋白序列的系统进化树分析结果显示,番薯(Ipomoea batatas)和互叶醉鱼草(Buddleja alternifolia)与积雪草 CYP716E41 蛋白的亲缘关系最近.组织特异性表达分析结果显示,CaCYP716E41 在根、茎、叶中均有表达,且在不同组织中相对表达量存在较大差异,叶片中的表达量最高.同时,为探究使用不同肥料对积雪草 CaCYP716E41 的表达调控机制,对积雪草分别施加氮、磷、钾肥,结果表明,施肥使该基因在根、茎、叶中的相对表达量均有不同程度的升高,且钾肥处理后其在茎中的相对表达量最高,约为 CK 的 9.3 倍,推测氮、磷、钾肥可以促进齐墩果酸 6-β-氧化酶的合成.本研究结果可为深入探究 CaCYP716E41 基因的调控机制提供参考,为进一步研究积雪草三萜类化合物生物合成途径奠定基础.
关键词：积雪草三萜类化合物齐墩果酸6-β-氧化酶基因克隆生物信息学分析表达分析
分类号：S567.239:Q943.2(经济作物)
资助基金：云南省重点研发计划项目(202202AE090012-04)云南省国际合作专项(2019IB011)
论文发表日期：2026-02-28
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 26-33 )
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