食管癌点突变型DNA聚合酶β与绿色荧光蛋白重组表达载体的构建
赵军
黄幼田
路静
杨洪艳
赵国强
董子明
1.郑州大学基础医学院,河南郑州,4500522.郑州大学基础医学院,河南郑州,4500523.郑州大学基础医学院,河南郑州,4500524.郑州大学基础医学院,河南郑州,4500525.郑州大学基础医学院,河南郑州,4500526.郑州大学基础医学院,河南郑州,450052
摘要：目的构建携带食管癌点突变型DNA聚合酶β基因的重组真核绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C3-polβ.方法运用PCR方法,从质粒pcDNA3.1-polβ中扩增出点突变型的DNA聚合酶β基因,作为目的片段,T-A克隆至pGEM-TEasy载体,再定向克隆至pEGFP-C3真核绿色荧光蛋白表达载体,重组质粒pEGFP-C3-polβ用限制性内切酶酶切和通用鉴定引物PCR扩增鉴定,并进行DNA序列分析.结果 DNA序列分析证实了重组载体中的DNA聚合酶β序列与已知的点突变型DNA聚合酶β基因序列相符.结论成功构建了携带食管癌点突变型DNA聚合酶β基因的重组的荧光蛋白表达载体pEGFP-C3-polβ,为DNA聚合酶β基因的体内外表达及蛋白定位提供了理想的标记.
关键词：DNA聚合酶β增强型绿色荧光蛋白点突变PCR扩增鉴定
分类号：R735.1(消化系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(39870287)教育部科学技术研究项目(02088)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 13-15 )
英文信息