反义DNA甲基化酶3b基因片断真核表达载体的构建及鉴定
左石1
罗剑2
刘民锋2
徐立宁2
董泾青2
郭伟2
邹声泉2
1.华中科技大学同济医学院附属同济医院,湖北,武汉,430030;贵阳医学院附属医院2.华中科技大学同济医学院附属同济医院,湖北,武汉,430030
摘要：目的构建反义DNA甲基化酶3b(DNMT3b)基因片断真核表达载体,为研究DNMT3b基因功能提供工具.方法根据DNMT3b基因cDNA序列中编码序列设计PCR引物,在上下游引物5′端分别添加XbaⅠ和KpnⅠ酶切位点,RT-PCR从胆管癌细胞QBC-939中获得485bp的DNA片断;将该片断反向插入真核表达载体pcDNA3.1(+)的多克隆位点,构建反义DNMT3b基因片断真核表达载体,并用PCR、酶切法和DNA测序鉴定.结果 PCR鉴定得到467bp特异条带,双酶切鉴定得到471bp片断和5.4kb载体片断,DNA测序说明插入片断序列正确.结论本研究构建的反义DNMT3b基因片断真核表达载体可为进一步研究DNMT3b基因功能提供实验工具.
关键词：DNMT3b反义技术表达载体基因克隆DNA甲基化
分类号：R394-33(医学遗传学)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 7-9 )
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