人巨细胞病毒PP150的原核表达及其ELISA诊断方法的建立
徐博1
王清2
1.青岛第九人民医院,山东青岛,2660022.青岛大学医学院附属医院
摘要：采用基因工程方法组建含有人巨细胞病毒(HCMV)PP150蛋白强抗原决定簇基因的重组抗原克隆,进行诱导表达及纯化,在此基础上,以纯化重组PP150蛋白作为包被抗原,对各种条件进行优化,确定判定标准,建立检测HCMV IgM抗体的间接ELISA方法.用此方法检测266份血清样品,并与ELISA试剂盒检测结果相比较.结果重组表达质粒pMAL-P2-PP150可在E.coliDH5a中有效表达,表达产物经SD S- PAGE电泳后,凝胶成像系统分析显示相对分子质量约为64 000,约占菌体蛋白的10%.Western blot检测,阳性识别率为80%(12/15).用此蛋白包被ELISA板,检测正常孕妇血清,与ELISA试剂盒的诊断符合率为98.1%,敏感性达88.2%,特异性100%.应用本方法检测569份正常人血清样品HCMV-IgM,阳性率为4.1%.提示该重组蛋白具有良好的抗原性,可望替代HCMV感染检测中的全病毒ELISA试剂盒.
关键词：巨细胞病毒人类基因原核表达酶联免疫吸附试验
分类号：R3(基础医学)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 23-25 )