靶向表皮生长因子受体shRNA质粒表达载体的构建和鉴定
邬跃刚1
曹政1
吴相柏1
魏亚元1
霍磊1
陶凯雄2
1.宜昌市第二人民医院,湖北,宜昌,4430002.华中科技大学同济医学院附属协和医院
摘要:目的 构建靶向表皮生长因子受体(EGFR)的短发卡状RNA(shRNA)质粒表达载体并进行鉴定.方法 设计两个小分子干扰RNA(siRNA)序列,体外合成DNA模板引物,与Pgenesil-1质粒构建成编码shRNA的表达载体,进行酶切鉴定和测序,再转染人大肠癌LoVo细胞,进行荧光摄像和G418抗性筛选.结果 构建的质粒表达载体完全符合设计要求,转染成功的细胞在荧光显微镜下显示为绿色,G418可以筛选出阳性克隆.结论 成功构建了编码EGFR-shRNA的质粒表达载体,并可以进行稳定筛选.
关键词:表皮生长因子受体小分子干扰RNA短发卡状RNA质粒载体
分类号:R3(基础医学)
资助基金:湖北省科技攻关计划(2005A304B09)
论文发表日期:2006-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:2( 11-12 )
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