人CCR7基因真核表达载体构建及表达
郭学光
陈正堂
1.重庆第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所,重庆,4000372.重庆第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所,重庆,400037
摘要:目的 构建人CCR7基因真核表达质粒,使其在真核细胞中稳定表达,为其临床应用奠定基础.方法 以RT-PCR法从临床肺腺癌标本中扩增出CCR7编码区序列,定向克隆至载体pEGFP-N1中构建质粒pEGFP-CCR7,采用脂质体介导的基因转染技术将重组质粒DNA导入肺腺癌A549细胞中,加入G418对细胞进行筛选获得稳定表达CCR7的细胞,并用流式细胞仪对重组质粒的表达进行鉴定.结果 PCR、酶切及测序结果证明重组质粒pEGFP-CCR7构建正确,荧光显微镜及流式细胞术在稳定转染A549细胞中检测到人CCR7的表达.结论 人CCR7基因真核表达质粒已成功构建并稳定转染肺癌A549细胞株;本研究为临床应用提供了实验依据.
关键词:肺癌受体CCR7基因肿瘤转移
分类号:Q784(基因工程(遗传工程))
资助基金:重庆市自然科学基金(2005BA5006)
论文发表日期:2007-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 15-17 )
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山东医药

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ISSN:1002-266X
年,卷(期):2007,47(11)
所属栏目:论著