目视化常见角膜致病真菌基因芯片的构建
张英朗1
王丽娅2
孙声桃2
李智涛3
1.郑州大学第一临床学院,河南,郑州,450003;河南省眼科研究所2.河南省眼科研究所3.河南省生物工程中心
摘要：目的 制备目视化常见角膜致病真菌基因芯片.方法 将6属12种角膜致病真菌设计合成特异性寡核苷酸探针加尾后,固定于带正电荷尼龙膜的相应区域,用生物素标记的通用引物对12株标准菌株和82株临床分离株进行PCR扩增,将扩增产物与固定有寡核苷酸探针的尼龙膜进行反向斑点杂交,观测相应区域的斑点显色情况.结果 12种真菌均产生了530～630 bp的PCR扩增产物,得到了具有各自特征的杂交后生物素-亲和素斑点显色图谱,可直接从该图谱上判断不同菌种.对82株临床分离株的检测敏感率为84.1%,未出现非特异性交叉反应.结论 利用PCR结合反向斑点杂交技术制备目视化基因芯片,能够在3～4 h完成对我国临床上常见的12种角膜致病真菌的菌种鉴定,特异性及敏感性较高.
关键词：基因芯片聚合酶链反应技术反向斑点杂交技术角膜病真菌
分类号：R772.21(眼纤维膜疾病)
资助基金：河南省高校杰出科研创新人才工程项目(0321002000)河南省科技攻关计划(0623033000)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：2( 3-4 )
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