真核表达载体质粒pcDNA4/rhHIF-1α的构建与鉴定
黄大林
陈森洲
袁桂峰
徐亚娟
刘菁
1.桂林医学院,广西桂林,5410042.桂林医学院,广西桂林,5410043.桂林医学院,广西桂林,5410044.桂林医学院,广西桂林,5410045.桂林医学院,广西桂林,541004
摘要：目的 构建重组人缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)真核表达载体质粒pcDNA4/rhHIF-1α,为进行人HIF-1α基因的克隆与表达及其抗体的制备研究奠定基础.方法 从人血细胞中提取总RNA,RT-PCR法反转录合成cDNA.设计两对引物分别调取目的 基因片段A和B,与T载体连接后转化大肠杆菌JM109,LB平板筛选菌落,提取质粒.测序正确后双酶切先后克隆进入pcDNA4/HisMaxA载体.结果 获得重组质粒pcDNA4/rhHIF-1α,经PCR扩增获得的目的基因相对分子质量与预计相同,插入pcDNA4/HisMaxA载体部位正确.结论 重组的人HIF-1α真核表达载体质粒pcDNA4/rhHIF-1α构建成功,所选用的pcDNA4/HisMax可高表达目的基因,可用于人HIF-1α基因的克隆与表达及其抗体制备的研究.
关键词：缺氧诱导因子-1载体质粒
分类号：R394(医学遗传学)
资助基金：广西科学基金(桂科基0575106)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 4-6 )
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