SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测BMI-1 mRNA方法的建立
陈凤花
胡丽华
王琳
李一荣
周志明
1.华中科技大学同济医院附属协和医院,湖北武汉,4300222.华中科技大学同济医院附属协和医院,湖北武汉,4300223.华中科技大学同济医院附属协和医院,湖北武汉,4300224.华中科技大学同济医院附属协和医院,湖北武汉,4300225.华中科技大学同济医院附属协和医院,湖北武汉,430022
摘要：目的 建立SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR定量检测人类BMI-1 mRNA的方法.方法 以含有目的基因BMI-1 cDNA的质粒pEGFP-BMI-1为阳性模板,进行纯化和定量及系列稀释,应用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测BMI-1,建立标准曲线,熔解曲线分析产物的特异性.结果 该法检测的线性范围为6.4×101～6.4×107拷贝,相关系数r为-1.00,6.4×103拷贝/反应的标本批内变异系数(CV)和日间CV分别为1.6%和2.8%.熔解曲线分析显示单一的峰,Tm为(80.40±0.18)℃.结论 SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR定量检测BMI-1 mRNA是快速有效、灵敏度高、特异性好的方法,可为BMI-Ⅰ的进一步研究奠定基础.
关键词：BMI-1SYBR Green Ⅰ荧光光度测定法
分类号：R392(医学免疫学)
资助基金：湖北省科技攻关项目(2005AA304B08)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 10-12 )
英文信息