携EGFP的STAT3载体构建、表达及其对HEP-2细胞的增殖抑制作用
郭慧1
杜波1
李晓明2
路秀英2
1.吉林大学第一医院,吉林长春,1300212.白求恩国际和平医院
摘要:目的 构建携EGFP的信号转导与转录激活因子(STAT)3 mRNA的小RNA干扰(siRNA)表达载体,并检测STAT3表达及其对HEP-2细胞增殖的抑制作用.方法 合成用于产生针对STAT3的小发卡状RNA(shRNA)寡核苷酸,克隆到PGPU6/EGFP/Neo载体中,BbsⅠ和BamHⅠ双酶切及测序鉴定重组体,并转染HEP-2细胞.流式细胞仪、RT-PCR、免疫印迹、MTT法检测HEP-2细胞中STAT3的表达及该细胞的增殖情况.结果 成功构建STAT3-siRNA表达载体,转染HEP-2后可显著抑制细胞STAT3 mRNA及蛋白的表达,细胞增殖活性显著降低(P<0.05). 结论 用pGPU6/EGFP/Neo载体,针对不同靶位点构建的STAT3-siRNA表达载体可有效抑制喉癌细胞增殖及其STAT3的表达.
关键词:RNA干扰转录激活因子3喉肿瘤HEP-2细胞
分类号:Q813(细胞工程)R739.6(耳鼻咽喉肿瘤)
资助基金:中国人民解放军医学科学技术研究十一五计划(06MA076)
论文发表日期:2008-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 18-20 )
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