核心蛋白聚糖在HepG2细胞中的表达及作用
张玉成1
王雅丽1
杜珍武1
高申1
吕俊峰2
张桂珍1
1.吉林大学中日联谊医院,吉林长春,1300332.吉林大学中日联谊医院,吉林长春,130033;吉林大学第二临床医院
摘要：目的 构建分泌型核心蛋白聚糖(DCN)真核表达载体,并观察其在肝癌细胞HepG2中的表达和抗肿瘤作用.方法 应用PCR技术扩增DCN全长基因eDNA片段,与pcDNA3.1载体连接,并转化到大肠杆菌中扩增获得重组载体,应用双酶切、PCR以及测序鉴定此重组载体,脂质体介导转染HepG2,经G418筛选建立稳定转染细胞株,采用RT-PCR、免疫组化检测其表达.MTT检测细胞增殖活力,流式细胞仪分析细胞周期.结果 RT-PCR可见转染组细胞mRNA表达明显增多,免疫组化可见转染组细胞DCN蛋白表达明显增高.细胞生长曲线显示转染组细胞生长缓慢,G,期细胞显著增多.结论 本方法可成功建立稳定转染DCN的HepG:细胞株,并证实DCN能够抑制HepG:细胞株的生长.
关键词：核心蛋白聚糖聚合酶链反应转染HepG2
分类号：R735.7(消化系肿瘤)
资助基金：吉林省发展与改革委员会计划资助项目(2006-1550)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 30-32 )
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