慢病毒介导的CyPA基因沉默对非小细胞肺癌细胞生长的影响
冯艳铭
王琳
姚武
吴卫东
吴逸明
1.郑州大学公共卫生学院,河南郑州,4500522.郑州大学公共卫生学院,河南郑州,4500523.郑州大学公共卫生学院,河南郑州,4500524.郑州大学公共卫生学院,河南郑州,4500525.郑州大学公共卫生学院,河南郑州,450052
摘要：目的 构建特异性沉默CyPA基因的慢病毒颗粒,体外观察其对非小细胞肺癌H1299细胞生长的影响. 方法根据已筛选的特异性沉默CyPA基因靶序列寡核苷酸,合成一对正义反义寡核苷酸DNA,采用基因克隆技术分别插入PGCL-GFP慢病毒载体,以脂质体法将重组PGCL-GFP与病毒包装载体pHelper1.0、pHelper 2.0共转染293T细胞,制备假包装病毒颗粒(Lv-shCyPA)并感染非小细胞肺癌H1299细胞,4 d后采用RT-PCR、Western-blot及MTT分别检测CyPA基因mRNA、蛋白表达水平及H1299细胞增殖状态.结果 构建的LV-shCyPA慢病毒颗粒感染H1299细胞,CyPA mRNA及蛋白表达显著下调,H1299细胞生长明显减缓,与未转染病毒、阴性对照病毒转染的H1299细胞比较有显著差异(P＜0.05).结论 成功构建了沉默CyPA基因慢病毒载体,其产生的假包装病毒颗粒能特异地沉默CyPA基因,抑制H1299细胞增殖,提示CyPA可能在非小细胞肺癌的发生发展中发挥一定的作用.
关键词：RNA干扰CyPA基因慢病毒肺肿瘤
分类号：R734.2(呼吸系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(30571552)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 31-33 )
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