缺氧诱导因子-1α shRNA 重组质粒的构建及对人结肠癌细胞生长的影响
王忱
史玉荣
胡凡果
牛瑞芳
郝希山
1.天津医科大学附属肿瘤医院,天津,3000602.天津医科大学附属肿瘤医院,天津,3000603.天津医科大学附属肿瘤医院,天津,3000604.天津医科大学附属肿瘤医院,天津,3000605.天津医科大学附属肿瘤医院,天津,300060
摘要：目的 构建靶向缺氧诱导因子-1α特异性短发卡RNA(shRNA)的真核表达载体,为结肠癌的靶向治疗奠定基础.方法 设计、合成针对缺氧诱导因子-1α的特异性短链寡核苷酸,构建缺氧诱导因子-1α特异性shRNA的重组质粒,稳定转染结肠癌SW480细胞;采用氯化钴制备缺氧诱导培养基,模拟肿瘤缺氧状态.采用实时定量聚合酶链反应和免疫印迹法检测转染前后SW480细胞中缺氧诱导因子-1α的表达;MTT法检测SW480细胞活性.结果 经酶切和测序鉴定,成功构建HIF-1α特异性shRNA的重组质粒,并能转染SW480细胞.转染后,缺氧诱导因子-1α mRNA和蛋白水平表达分别下降约86.1%和79.7%,肿瘤细胞增殖活性明显降低.结论 运用pGenesil-1质粒载体构建的靶向HIF-1α特异性shRNA的重组质粒已成功构建,该质粒可转染SW480细胞,有效抑制HIF-1α的表达;本研究可为结肠癌的靶向治疗提供新方法.
关键词：结肠肿瘤结肠癌短发卡RNA缺氧诱导因子-1α
分类号：R735.3(消化系肿瘤)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 18-20 )
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