人宫颈癌基因表达载体的构建及其在肝癌相关研究中的价值
周锦勇
潘金顺
张乐
刘勇
顾香芳
陈军浩
1.南京大学医学院附属鼓楼医院,江苏南京,2100082.南京大学医学院附属鼓楼医院,江苏南京,2100083.南京大学医学院附属鼓楼医院,江苏南京,2100084.南京大学医学院附属鼓楼医院,江苏南京,2100085.南京大学医学院附属鼓楼医院,江苏南京,2100086.南京大学医学院附属鼓楼医院,江苏南京,210008
摘要：目的 为人宫颈癌基因(HCCR)在肝癌发生、发展中的生物学效应及机制研究提供理想工具.方法 培养人HepG2细胞,RT-PCR扩增出HCCR基因片段,将其连接到pCR T7 TOPO TA/NT克隆载体中,命名为pCR T7 TOPO TA/NT-HCCR.运用交叉引物PCR筛选正确连接的克隆.再用EcoR I和BamH I限制性内切酶酶切鉴定和测序验证.将其转化BL21细菌,用IPTG诱导其表达相应的蛋白质,并用Western blotting验证.结果 pCR T7 TOPO TA/NT-HCCR原核表达载体构建成功.酶切鉴定和测序均与预期一致.用IPTG诱导转化此质粒后的BL21细菌,得到相应大小的蛋白质.结论 pCR T7 TOPO TA/NT-HCCR 原核表达载体构建成功;其可作为HCCR基因功能研究及其与肝癌相关性研究的理想工具.
关键词：基因克隆逆转录聚合酶链反应人类宫颈癌癌基因肝肿瘤肝癌
分类号：R735.7(消化系肿瘤)
资助基金：南京市卫生局课题资助项目(YKK05123)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 26-28 )
英文信息