重组人psoriasin蛋白的制备与鉴定
陈章权
梁晓东
陆田田
黄震
1.广东医学院临床免疫学教研室,广东湛江,5240232.广东医学院临床免疫学教研室,广东湛江,5240233.广东医学院临床免疫学教研室,广东湛江,5240234.广东医学院临床免疫学教研室,广东湛江,524023
摘要：目的 制备鉴定人psoriasin重组蛋白,为其作用机制的深入研究奠定基础.方法 PCR法扩增人psoriasin基因,克隆至pET28原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3).用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,用Ni2+-NTA凝胶亲和层析纯化目的 蛋白,用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot法对重组蛋白的相对分子质量、纯度和免疫原性进行分析.结果 psoriasin编码区基因扩增得到一306 bp特异条带,BLAST分析显示碱基无突变,阅读框架正确;SDS-PAGE显示纯化出相对分子质量为14 kD的重组psoriasin,纯度＞95%;Western blot显示该重组蛋白能与抗人psoriasin单克隆抗体发生特异性反应.结论 psoriasin重组蛋白成功制备,该蛋白具有较好的免疫活性,可用于进一步的研究.
关键词：psoriasin表达纯化鉴定
分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)
资助基金：广东省医学科学技术研究基金资助项目(1060043)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 21-23 )
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